化妆品紧致功效测试 体外成纤维细胞弹性蛋白含量测定

【适用范围】 本文件规定了化妆品紧致功效测试-体外成纤维细胞弹性蛋白含量测定的原理、材料、试验方法、 结果计算、质量控制、结果评价和结论。 本文件适用于应用人皮肤成纤维细胞测试化妆品及原料促进弹性蛋白合成的能力，为化妆品及原料 紧致功效宣称提供科学支持。 【主要技术内容】 1、弹性蛋白合成原理 人皮肤成纤维细胞能在体内合成Ⅰ型前胶原和原弹性蛋白并分泌至胞外，原弹性蛋白在赖氨酰氧化 酶等的催化氧化下形成其特有的交联结构而形成弹性蛋白。弹性纤维由弹性蛋白和微原纤维构成，分布 于真皮及皮下组织，使皮肤具有弹性。人皮肤成纤维细胞可以作为研究化妆品提升弹性蛋白含量的细胞 模型，通过测定受试物给药后，细胞弹性蛋白含量的上调率，评价受试物是否存在促进弹性蛋白合成的 能力。 2、弹性蛋白测试原理 弹性蛋白与包被在酶标板上的弹性蛋白抗体特异性结合后，与带有底物标记的抗弹性蛋白抗体结合， 底物被酶催化后，生成有色产物，弹性蛋白含量与有色产物颜色的深浅呈正相关。用酶标仪在450nm波 长下测定光密度（OD）值，计算弹性蛋白含量。