刺梨汁中总黄酮含量的测定

【适用范围】 本文件规定了刺梨汁中总黄酮含量（以芦丁计）测定的紫外分光光度法。 本文件适用于刺梨原汁、浓缩汁中总黄酮含量的测定。 本文件总黄酮的检出限：0.63? mg/100?g；定量限：7.0? mg/100? g。 【主要技术内容】 3 原理 黄酮类化合物由于自身结构特征，可在?360nm?波长附近产生最大吸收，在一定浓度范围内，其浓度与吸光度符合朗伯比尔定律。与芦丁标准品比较，进行待测物中总黄酮的定量测定。 4 试剂和材料 4.1 试剂 4.1.1 芦丁（C27H30O16）标准品（含量≥97 %）。 4.1.2 无水乙醇:分析纯。 4.1.3 甲醇:分析纯。 4.2 标准溶液配制 4.2.1 芦丁标准储备溶液 称取?25 mg（精确至?0.1 mg）芦丁，加甲醇溶解并定容至?25 mL，得?1mg/mL?标准储备溶液。 4.2.2 芦丁标准中间溶液 吸取芦丁标准储备溶液?2.5 mL，加甲醇溶解并定容至?100mL，得?25 μg/mL?标准工作溶液。 5 仪器和设备 5.1 天平:感量为?0.1mg。 5.2 超声波清洗器。 5.3 紫外分光光度计。 6 分析步骤 6.1 试样制备 称取?1g（精确至?0.1 mg）的试样至?25ml?容量瓶中，用乙醇定容，摇匀后，超声提取?20min，室温静置?30min。 6.2标准工作曲线 准确吸取芦丁标准中间溶液?1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL?分别置于?25mL?比色管中，加甲醇至刻度，摇匀，配置成浓度为?1.0μg/mL、2.0μg/mL、3.0μg/mL、4.0μg/mL、5.0μg/mL?系列标准溶液，用?1cm?比色皿，以甲醇调节零点，于波长?360nm?处测定其吸光度值。以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。 6.3 试样的测定 吸取上述提取液?1.0mL?于?25mL?比色管中，加甲醇至刻度，摇匀，用?1cm?比色皿，以甲醇调节零点，于波长?360nm?处测定吸光度。同时做试剂空白。 7分析结果的表述 试样中总黄酮含量（以芦丁计）按公式（1）进行计算。 C×V×F×100 X = ---------------- M×1000 ………………………（1） 式中: X───试样中总黄酮含量（以芦丁计）,单位为毫克每百克（mg/100 g）； C───试样提取液中被测总黄酮含量（以芦丁计）,单位为微克每毫升（μg/mL）； M───试样质量,单位为克（g）； F───提取液稀释倍数； V ───试样定容体积,单位为毫升（mL）； 计算结果保留小数点后两位。 8 精密度 在重复条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的?10 %。