美洲黑杨性别苗期鉴定技术规程—SSR 分 子标记法

【适用范围】 本文件确立了利用SSR分子标记对美洲黑杨进行苗期鉴定的程序。 本文件适用于以美洲黑杨（Populus deltoides）苗期幼嫩组织（叶片、芽等）为材料，利用SSR分子标记对美洲黑杨性别苗期进行分子鉴定的原理、主要仪器、试剂、操作程序和鉴定结论。 【主要技术内容】 本文件围绕杨树飘絮对产业的影响，建立杨树性别苗期鉴定的标准体系，不仅可以加速不飞絮雄性良种的选育，还有助于减少雌性商品苗的流通，为遏制杨絮的产生提供稳定可行的技术标准。技术内容总体可分为DNA提取、PCR扩增、扩增产物的电泳检测和性别结果的判定4个部分。 1）DNA提取：标准中规定了DNA提取的详细步骤，包括样品的研磨、DNA的提取及DNA质量的检测，为后续的性别鉴定提供高质量DNA保证。 2）PCR扩增：选择标准中列出的性别鉴定SSR引物中任一对，按照标准中规定了反应体系及扩增程序完成PCR扩增。 3）PCR扩增产物检测：按照标准中规定的步骤进行扩增产物检测，获得凝胶电泳胶图。 4）性别结果判定：在凝胶电泳胶图中，若待测样品扩增到标准规定目标片段大小的电泳条带，则为雄株；反之，为雌株。