人羊膜间充质干细胞外泌体

【主要技术内容】 5 技术要求 5.1 原材料 5.1.1 应符合 T/CSCB 0001-2022 要求。 5.1.2 应建立供者细胞采集的供者评估与筛选标准、采集方法、运输标准和交接标准，保证供者和细胞的安全。 5.1.3 供体应筛查 HIV、HBV、HCV、HTLV、EBV、HCMV 和 TP，并记录结果。 5.2 制备与纯化方法 5.2.1 人羊膜间充质干细胞 人羊膜间充质干细胞关键质量属性应符合 T/LNSI 001-2023 的规定。 5.2.2 人羊膜间充质干细胞培养上清 为了获得高质量的外泌体，收获外泌体最佳时间限定为 P2-P3代人羊膜间充质干细胞，要求融合率 达 95%以上的细胞上清。 5.2.3 外泌体的制备与纯化应符合 T/CSCB 0007-2022 的要求。 5.3 关键质量属性 5.3.1 形态 透射电显微镜观察，外泌体形态为双层膜结构的茶托状结构。 5.3.2 粒径 外泌体粒径应小于 200nm，且在 60-120nm 范围内形成粒径峰值。 5.3.3 浓度 用于皮肤及骨关节抗衰用人羊膜间充质干细胞外泌体浓度应不低于 3×10^10颗粒/ml。 5.3.4 标志蛋白 外泌体表面标志物 CD63、CD81 和 CD9 中的任意两个表达阳性。 5.3.5 微生物 真菌、细菌、支原体、HIV、HBV、HCV、HTLV、EBV、HCMV、TP 为阴性。 5.3.6 过程控制 人羊膜间充质干细胞制备过程控制应符合 T/LNSI 001-2023 要求。 外泌体分离过程控制应符合 T/CSCB 0007-2022 的要求。