黄芪茎叶中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量 测定标准

【适用范围】 本文件规定了宁夏地区黄芪茎叶中毛蕊异黄酮葡萄糖苷测定术语、定义、原理、试剂、材料、仪器、设备、样本采集与制备、测定步骤、结果计算等。 本文件适用于宁夏地区黄芪茎叶中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量测定。检出限为7.03125–112.5μg/mL L。 【主要技术内容】 高效液相色谱法以经典的液相色谱为基础，以液体为流动相，将不同极性的溶剂泵入装有颗粒极细的高效固定相色谱柱中，在色谱柱中被分离并进入检测器进行检测，从而实现对样本的快速、高灵敏的检测。通过此方法对黄芪茎叶中毛蕊异黄酮葡萄糖苷进行检测和确证。 7.1试样的制备 取黄芪茎叶样品于多功能粉碎机粉碎，过20目筛网备用。 7.2 液相溶液的制备 7.2.1 标准品溶液制备 精密称取毛蕊异黄酮葡萄糖苷标准品4.5 mg，置于10 mL容量瓶，甲醇定容至刻度，即得 450μg/mL毛蕊异黄酮葡萄糖苷标准品溶液。 7.2.2 试样品溶液制备 精密称取过筛黄芪茎叶粉1g, 置圆底烧瓶中,加入50 mL甲醇, 称定重量, 加热回流 4 h, 放冷, 再称定重量, 用甲醇补足减失的重量, 摇匀, 滤液经0.22 um滤膜过滤，即得试样品溶液。 7.3 试样的测定 吸取供试品溶液20μL，在流动相为0.2%甲酸（A）-乙腈（B）（0~8 min 80%A~60%），柱温30℃，波长260 nm，流速1mL/min条件下进样，重复测定3次。 7.4 标曲建立 取450 μg/mLL准品溶液适量，分别配制浓度为112.5、56.25、28.125、14.0625、7.03125 μg/mL的毛蕊异黄酮葡萄糖苷标准溶液，吸取标准品溶液20μL，流动相为0.2%甲酸（A）-乙腈（B）（0~8 min 80%A~60%），柱温30℃，波长260 nm，流速1mL/min条件下进样，以峰面积对应的质量浓度建立毛蕊异黄酮葡萄糖苷标准曲线。