生乳中16种杀菌剂残留量的测定 气相色谱-串联质谱法

【适用范围】 本文件规定了生乳中嘧霉胺、阿拉酸式苯-S-甲基、三唑酮、戊菌唑、氟吡菌酰胺、三唑醇、醚菌酯、腈菌唑、吡噻菌胺、氟吡菌胺、苯菌酮、异丙噻菌胺、吡唑萘菌胺、联苯吡菌胺、苯并烯氟菌唑和嘧菌酯残留量的气相色谱-串联质谱测定方法。 本文件适用于生牛乳中嘧霉胺、阿拉酸式苯-S-甲基、三唑酮、戊菌唑、氟吡菌酰胺、三唑醇、醚菌酯、腈菌唑、吡噻菌胺、氟吡菌胺、苯菌酮、异丙噻菌胺、吡唑萘菌胺、联苯吡菌胺、苯并烯氟菌唑和嘧菌酯残留量的测定。 【主要技术内容】 5.3 标准溶液配制 5.3.1 标准储备液（1 000 mg/L）：称取10 mg（精确至0.1 mg）标准品，分别用丙酮溶解并定容至10 mL，避光置于－18℃以下条件保存，有效期1年。 5.3.2 混合标准溶液（5 mg/L）：准确吸取50 μL各标准储备液于10 mL容量瓶中，用丙酮稀释并定容至刻度，避光－18℃以下条件保存，有效期1个月。 5.3.3 混合标准工作液：准确吸取混合标准溶液适量，用乙酸乙酯稀释成质量浓度为0.005 mg/L、0.01 mg/L、0.02 mg/L、0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.2 mg/L的系列混合标准工作溶液。现用现配。 5.4 材料 5.4.1 乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶（PSA）：粒径40 μm～60 μm。 5.4.2 十八烷基硅烷键合硅胶（C18）：粒径40 μm～60 μm。 5.4.3 有机相微孔滤膜：0.22 μm孔径，尼龙材质。 6 仪器和设备 6.1 气相色谱-串联质谱仪：配有电子轰击源（EI）。 6.2 分析天平：感量0.01 mg和0.01 g。 6.3 涡旋混合仪。 6.4 超声波仪。 6.5 冷冻离心机：转速≥5 000 r/min。 6.6 氮吹仪。 7 试样的制备与保存 7.1 试样的制备 取适量新鲜或解冻的空白或供试试样，混匀。 a) 取混匀后的供试样品，作为供试试样； b) 取混匀后的空白样品，作为空白试样。 7.2 试样的保存 －18℃及以下保存。 8 测定步骤 8.1 提取与净化 称取10.00 g供试试样于50 mL离心管中，精确加入10 mL乙腈涡旋混匀，超声提取5 min后，加入10 g无水硫酸钠、1.5 g氯化钠，剧烈振荡1 min，4℃条件下5 000 r/min离心5 min，吸取4 mL上清液至含有1 g无水硫酸钠、100 mg PSA、120 mg C18的离心管中，涡旋混匀1 min，4℃条件下5 000 r/min离心5 min。精确吸取2 mL上清液，置于40℃水浴中氮气吹干，精确加入1 mL乙酸乙酯溶解，混匀，过有机相微孔滤膜，供气相色谱-串联质谱仪测定。 8.2 基质匹配标准工作曲线的制备 选择空白试样按照8.1步骤进行前处理，置于40℃水浴中氮气吹干，分别加入系列混合标准工作溶液1 mL溶解残渣，过有机相微孔滤膜，制备0.005 mg/L、0.01 mg/L、0.02 mg/L、0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.2 mg/L的系列基质匹配标准工作溶液，供气相色谱-串联质谱仪测定。以待测物定量离子峰面积为纵坐标，相对应的基质匹配标准工作溶液质量浓度为横坐标，绘制基质匹配标准工作曲线，拟合回归方程并计算回归系数。 8.3 测定 8.3.1 气相色谱参考条件 a) 色谱柱：14%腈丙基苯基-86%二甲基聚硅氧烷石英毛细管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm），或相当者； b) 色谱柱升温程序：60℃保持1 min，然后以25℃/min程序升温至210℃，再以10℃/min升温至300℃，保持7 min； c) 载气：氦气，纯度≥99.999%，流速1.2 mL/min； d) 进样口温度：280℃； e) 进样量：1 μL； f) 进样方式：不分流进样。